Стандарты мутности МакФарланда ( McFarland Standard ) пробирках 0.5, 1, 2, 3, 4 и 5 ед. ( 70900 )

Стандарт мутности МакФарланда

 McFarland Standard  пробирках 0.5, 1, 2, 3, 4 и 5 ед. ( 70900 )

Стандарт мутности МакФарланда 0,5 можно найти у разных производителей. Его можно приготовить и собственными силами, добавив 0,5 мл раствора дигидрата хлорида бария (BaCl₂•2H₂O) концентрации 1,175% (вес/объем) к 99,5 мл серной кислоты в концентрации 1% (объем/объем). Примечание: можно также использовать суспензию частиц латекса. После приготовления стандарт мутности разливают порциями (аликвотами) в такие же пробирки, как те, в которых готовят культуру для посева. Чтобы предотвратить испарение, плотно закупорьте пробирки со стандартом МакФарланда и храните их в темноте при комнатной температуре (22–25 °С).

Следует проверить оптическую плотность приготовленного стандарта МакФарланда на спектрофотометре. При длине светового пути (размер кюветы) 1 см и длине волны 625 нм оптическая плотность стандарта МакФарланда 0,5 должна составлять 0,08–0,13. Можно проверить стандарт МакФарланда и другим способом: разведите суспензию контрольного штамма (например, кишечной палочки E. coli ATCC 25922) до такой же мутности, как стандарт, приготовьте серию 10-кратных разведений этой суспензии, высейте разведения на чашки и подсчитайте число колоний на чашках. Суспензия бактерий с такой же мутностью, как стандарт, должна иметь концентрацию 10⁸ колониеобразующих единиц/мл. Проверяйте оптическую плотность стандарта МакФарланда ежемесячно и готовьте новый стандарт, когда потребуется.

Перед каждым употреблениям хорошо потрясите пробирку со стандартом, чтобы взболтать нежный белый осадок сульфата бария, и проверьте суспензию на однородность. Выкиньте стандарт, если он содержит крупные частицы. Суспензию частиц латекса следует перемешивать, аккуратно переворачивая пробирку.

В основе конструирования стандартов лежит оптическая плотность раствора и соответствие её какому-то количеству микроорганизмов, которое определяется соответствующими методиками. Следует иметь в виду, что количество М.О. в единице объёма зависит и от размера микробных клеток. Для энтеробактерий, неферментирующих, стафилококков и ряда других М.О. при практически одинаковой оптической плотности нет существенных различий в количестве М.О. в единице объема. Для грибов рода Candida при 0,5 МакФаланда содержится микробных клеток в 30 раз меньше, чем энтеробактерий.